Bradford reaktifi nedir ve ne amacla kullanilir?

[Admin]

Bradford reaktifi nedir ve ne amaçla kullanılır?​

Bradford (Coomassie Brillant Blue) Yöntemi Yöntem, organik boyaların, proteinlerin asidik ve bazik gruplarıyla etkileşerek renk oluşturması esasına dayanır. Boya bağlama temelli yöntemlerin en yaygını, Bradford tarafından geliştirilen ve Coomassie Brillant Blue G-250 boyasının kullanıldığı yöntemdir.

BCA yöntemi nedir?​

BCA stoğu, bikinkoninik asit, sodyum karbonat, sodyum bikarbonat, sodyum tartarat, ve bakır(II) sülfat pentahidrat içerir. BCA tahlili temelinde iki tepkimeye dayanır. İlki proteindeki peptit bağlarının Cu2+ iyonlarını Cu+ ya indirgemesidir ve bu adım sıcaklığa bağlı bir reaksiyondur.
Protein katsayısı nedir?
Bu katsayı genellikle 6.25 olup, süt ve ürünlerinde 6.38, tahıl ve ürünlerinde 5.70’dir. Kjeldahl yöntemi ile protein halinde bulunmayan amin, amid ve amonyum gibi azotlu bileşikler de protein gibi belirlendiğinden bazı durumlarda azotlu bileşikler için “ham protein” ifadesi kullanılır.

Folin reaktifi ne işe yarar?​

İndirgenmiş bakır ve proteinlerin yan zincirinde yer alan Tyr, Trp ve Cys aminoasitleri Folin-Fenol reaktifini indirgeyerek renk oluşumuna neden olur olur. Oluşan rengin şiddeti protein konsantrasyonu ile doğru orantılıdır ve 660 nm’de spektrofotometrik olarak ölçülür.

Protein neden Saflaştırılır?​

Bugün pekçok enzim ve enzim olmayan proteinin saf ve kristal halde izole edilmesi başarılmıştır. Bir proteinin amino asit kompozisyonunu ve dizilişini, molekül ağırlığını ve diğer fiziksel özelliklerini çalışmak için öncelikle proteinin saflaştırılması gereklidir.
Lowry yöntemi nedir?
Lowry protein tahlil solusyondaki total protein konsantrasyonunu belirlemek için uygulanan biyokimyasal tahlil. Total protein konsantrasyonu numune solusyonundaki renk değişikliği ile gözlemlenir. Bu renk değişimi protein konsantrasyonuna oranla değişir ve kolorimetrik tekniklerle ölçülebilir.
Folin-Ciocalteu reaktifi (Folin Fenol Reaktifi veya Folin-Denis reaktifi) fosfomolibdat ve fosfotungstat karışımı bir reaktif olup fenolik ve polifenolik antioksidanların kolorimetrik tayininde kullanılır (Singleton et al., 1965).
Proteinlerin 2D-PAGE ile ayrıştırılmasının ilk boyutu olan izoelektrik odaklanma basamağının gerçekleştirildiği cihazdır. Elektroforez elektriksel yükü olan moleküllerin elektrik alanda hareket etmesi temeline dayan bir ayrıştırma yöntemidir.
Biüre deneyi nedir?
Biuret testi (Piotrowski testi), peptit bağlarının varlığını tespit etmek için kullanılan kimyasal bir testtir. Peptidlerin varlığında, bir bakır (II) iyonu, alkali bir çözelti içinde menekşe renkli koordinasyon kompleksleri oluşturur.