Afinite kromatografisi nedir?

[Admin]

Afinite kromatografisi nedir?​

Afinite kromatografisi, hedef biyomolekülün, çözünmeyen bir destek materyali (matriks) üzerine immobilize edilen ve hedef molekülü tamamlayıcı bağlanma uçları içeren ligandlar tarafından spesifik ve geri dönüşümlü olarak adsorbe edilmesine dayalı bir yöntemdir [2, 32].

Protein Saflaştırmanın amacı nedir?​

Protein saflaştırması, karmaşık bir karışımdan tek bir tip proteini izole etmek için izlenen bir seri süreçtir. İlgi duyulan bir proteinin işlevi, yapısı ve diğer proteinlerle etkileşiminin karakterizasyonu için protein saflaştırması şarttır.
Jel filtrasyon kromatografisinde (GFC) molekülün boyutuna göre bir ayırma gerçekleştirilir. Ayırma işlemi, kolonda bulunan porlu jel matriks ve çözücü arasında meydana gelir. Kolona uygulanan örnek molekülleri, porların boyutundan çok büyükse, matriks tarafından tutulmaz ve kolonu ilk olarak terk eder.
Proteinlerin Fraksiyonlanması nedir?
Protein çözeltisinde hidrofobik alanları büyük ve daha fazla olan proteinler, hidrofobik alanları küçük ve daha az olanlarınkine göre daha çabuk birbirleri ile etkileşerek çökerler. Bu olaya proteinlerin fraksiyonlanması denir.
Partisyon kromatografisi nedir?
DAĞILIM (PARTİSYON) KROMATOGRAFİSİ Dağılım, bir karışımdaki maddelerin birden fazla çözücü içerisindeki çözünürlükleri oranında dağılmasıdır. Bu, çözücünün ve maddenin özelliklerine bağlı bir fonksiyondur. Bu kromatografide ayırım çözünürlük esasına göre karışımın sabit ve hareketli faz arasındaki dağılımına dayanır.

Protein tayini neden önemlidir?​

Bir enzim veya protein saflaştırılması işleminde saflaştırmanın gidişinin izlenebilmesi amacıyla her adımda protein tayini yapılması gerekir. Ancak bu sayede çalışmanın verimi ile ilgili yorum yapılabilir. Buna ilave olarak enzimin aktivite tayinlerinin de yapılması gerekir.

Jel geçirgenlik kromatografisi hangi amaçla kullanılır?​

Laboratuvarlar. Büyüklükçe Ayırma Kromatografısi (SEC) olarakta bilinen ,Jel Geçirgenlik Kromatografısi (GPC), molekülleri tanecik boyutlarına göre ayrıştıran bir kromatografik yöntemdir. Bu yöntem polimerlerin molekül ağırlığı ve molekül ağırlığı dağılımı tayininde hızlı ve kesin sonuç almak için kullanılır.
Protein denatürasyona uğradığında sekonder, tersiyer ve kuaterner yapıları bozulur fakat primer yapıdaki amino asitler arasındaki peptit bağları sağlam kalır. Protein denatürasyona uğrar uğramaz tüm yapısal düzeylerin bir arada bulunduğu durumdaki fonksiyonunu artık yerine getiremez duruma gelir.